Estudio de los sideróforos y de las proteinas receptoras producidas por las bacterias patógenas de peces"Photobacterium damselae subsp.psicicida y Aeromonas salmonicida subsp.salmonicida"

  1. Valderrama Pereira, Andrea Katherine
Supervised by:
  1. Carlos Jiménez Co-director
  2. Jaime Rodríguez Co-director
  3. Antón Vila-Sanjurjo Co-director

Defence university: Universidade da Coruña

Fecha de defensa: 18 November 2016

Committee:
  1. Ana Estévez Braun Chair
  2. Manuel Luis Lemos Ramos Secretary
  3. Pedro J. Barbosa Pereira Committee member

Type: Thesis

Teseo: 434009 DIALNET lock_openRUC editor

Abstract

A continuación se presenta el resumen de cada uno de los capítulos que hacen parte de esta tesis doctoral. Capítulo I: En esta sección se describe la importancia de la acuicultura a nivel mundial y las enfermedades causadas por bacterias patógenas que producen grandes pérdidas económicas a esta industria. Del mismo modo, se aborda el tratamiento de estas enfermedades y la posibilidad de usar los mecanismos de captación de hierro para desarrollar nuevas vacunas y antimicrobianos. Por último se presentan las estrategias para la expresión heteróloga de proteínas de membrana, su purificación y cristalización. Capítulo II: Se realizó el clonaje, la expresión y purificación de rFrpA, proteína receptora de la piscibactina, sideróforo de Photobacterium damselae subsp. piscicida. La proteína obtenida se utilizó en ensayos de vacunación lográndose protección en los peces tratados. Además, mediante cristalografía de rayos X se realizó una aproximación a la estructura tridimensional de rFrpA. Por otra parte, se prepararon intermedios avanzados que permitieron progresar en la síntesis total de la piscibactina. Capítulo III: Se estudiaron los sideróforos producidos por Aeromonas salmonicida subsp. salmonicida. En primer lugar se aislaron, purificaron y caracterizaron las amonabactinas Amo P 693 y Amo P 750. Posteriormente, mediante espectrometría de masas, se identificaron los complejos de Fe(III) y Ga(III) de las amonabactinas Amo T 732, Amo T 789, Amo P 693 y Amo P 750. Por otra parte, se realizó el clonaje, la expresión y purificación de rFstA, proteína receptora de sideróforos de esta bacteria.