Desarrollo de nuevas técnicas para el análisis genético en fibrosis quísticaaplicación al cribado neonatal

Abstract

La fibrosis quística (FQ) es una de las enfermedades autosómicas recesivas graves más frecuentes en la población Caucásica. Su incidencia a nivel mundial se estima en torno a 1 de cada 2500 nacidos. Son características comunes de esta enfermedad la patología respiratoria obstructiva, la insuficiencia pancreática, los problemas nutricionales y los problemas reproductivos. El diagnóstico de esta enfermedad se basa principalmente en la detección de niveles altos de cloro en sudor y en la identificación de mutaciones en el gen CFTR (Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator). Durante los últimos años se ha producido una importante mejora en la calidad y esperanza de vida de los pacientes con FQ. Las últimas estimaciones indican una esperanza de vida próxima a los 40 años para un niño con FQ nacido en los años 90. Uno de los factores que ha contribuído de una manera importante a esta mejora en la calidad de vida es la realización de programas de cribado neonatal de la enfermedad, que identifican a pacientes con anterioridad a presentar sintomatología. Numerosos estudios han demostrado los beneficios clínicos asociados al diagnostico neonatal de la enfermedad, tanto en la evolución clínica de los pacientes como en su morbilidad. Debido a ello los programas de cribado neonatal para la FQ se han instaurado ya en diferentes países del mundo realizándose actualmente de manera oficial en cuatro comunidades españolas. En esta tesis hemos desarrollado diferentes técnicas de diagnóstico molecular para su utilización en un programa piloto de cribado neonatal para la fibrosis quística en Galicia. La primera técnica desarrollada consistió en la secuenciación directa del gen CFTR. Para intentar solventar los problemas resultantes de la utilización de la secuenciación dentro del programa de cribado se desarrolló con posterioridad una novedosa técnica de espectrometría de masas para el análisis mutacional del gen (plataforma Sequenom MassArray®) que resultó ofrecer unos resultados óptimos para la realización de este tipo de programas. Los resultados procedentes del programa piloto de cribado neonatal para la fibrosis quística realizado en Galicia durante el período 2003-2007 han mostrado una prevalencia al nacimiento en nuestra comunidad de 1 cada 5835 nacimientos, semejante (aunque ligeramente inferior) a la existente en otras comunidades españolas en las que también se realizan este tipo de programas. Asimismo hemos podido crear un mapa poblacional de las mutaciones más frecuentes en nuestra comunidad. Por último se han podido comprobar los beneficios en la evolución clínica de estos pacientes debidos al diagnóstico temprano de su enfermedad.