Enfermedad de McArdle o glucogenosis Vestudio molecular del gen de la miofosforilasa

Resumo

La enfermedad de McArdle es la glucogenosis muscular más frecuente y se caracteriza clínicamente por ser una enfermedad con intolerancia al ejercicio que presenta mialgias y calambres musculares. La Glucogenosis V se debe a un déficit de la glucógeno fosforilasa muscular o miofosforilasa. El gen que codifica esta proteína, de gran importancia en la degradación del glucógeno, es PYGM con localización cromosómica 11q13. Esta enfermedad sigue un patrón de herencia autosómica recesiva por lo que los afectos presentan una mutación en PYGM en homozigosis o una doble heterozigosis. El diagnóstico de la enfermedad de McArdle se puede establecer fácilmente mediante el estudio histoquímico o bioquímico de la biopsia muscular, o bien a través del estudio genético si existen antecedentes familiares ya diagnosticados. Los análisis genéticos realizados sobre la enfermedad de McArdle indican un alto grado de heterogeneidad alélica. Hasta el momento se han descrito más de 100 mutaciones distintas que se distribuyen a lo largo de los 20 exones del gen y las regiones intrónicas flanqueantes. Estas mutaciones localizadas en PYGM son, en su mayoría, sustituciones nucleotídicas de tipo nonsense y missense, pero también se encontraron mutaciones de tipo frameshift, splice-junction, deleciones o indels. Dentro de este amplio grado de heterogeneidad genética, la mayoría de las mutaciones sólo se han descrito en casos aislados. En cambio, algunas mutaciones presentan una alta incidencia en la población como es el caso de la nonsense R50X localizada en el exón 1 de PYGM, siendo la mutación de mayor incidencia en la población general. En Europa, su prevalencia parece seguir un gradiente Norte-Sur, siendo más frecuente en países centroeuropeos que en mediterráneos. En España, las mutaciones más frecuentes, además de la R50X, son las missense W798R y G205S. La W798R, hasta el momento, se ha encontrado únicamente en pacientes de origen español, por lo que se puede considerar una mutación privada de alta frecuencia. En cambio, la mutación G205S se encuentra en una frecuencia similar tanto en pacientes europeos como americanos. En esta tesis doctoral estudiamos una serie de 118 pacientes diagnosticados de enfermedad de McArdle procedentes de distintos orígenes, en su mayoría de origen español y de origen francés (Genethon, París). Con el estudio por PCR-RFLP de la R50X, W798R y G205S se pudo establecer el diagnóstico genético de la enfermedad de McArdle en 71 pacientes, lo que representa un 60.2% de la población estudiada, e incluso detectar al menos la mutación en uno de los alelos en 106 pacientes, representando un significativo 89.3%. Del total de la serie, 47 pacientes no presentaban ninguna de estas mutaciones o eran heterozigotos para una sola de ellas, por lo que se integraron en un programa de secuenciación de los exones y regiones adyacentes de PYGM. El análisis por secuenciación en estos pacientes permitió la localización de 32 mutaciones diferentes a lo largo del gen, 15 que ya habían sido descritas con anterioridad y 17 mutaciones nuevas, registradas en la Human Gene Mutation Database. En su mayoría fueron sustituciones nucleotídicas, nueve mutaciones missense y una nonsense, aunque también se identificaron cinco deleciones y dos inserciones. Por último, y teniendo en cuenta los resultados obtenidos, creemos necesario incluir el estudio rutinario de las tres mutaciones más frecuentes en los pacientes de origen español. Este estudio genético reduciría la indicación de la biopsia muscular y se establecería el diagnóstico de forma menos agresiva para el paciente. Sin embargo, si el estudio es negativo para estas tres mutaciones, creemos aconsejable la realización de la biopsia. El diagnóstico de la enfermedad de McArdle no siempre es fácil desde el punto de vista clínico, por lo que, en aquellos pacientes en los que los síntomas no sean claros o no estén bien definidos se hace obligatoria la realización de la biopsia muscular para establecer un diagnóstico adecuado.