La regulación de la biosíntesis de Hemo en Kluyveromyces lactisregulación transcripcional de los genes KLHEM1,KLHEM12 y análisis comparativo de los factores reguladores HAP1P y SRB10P en levaduras

Resumo

Kluyveromyces lactis es una levadura de elevado interés biotecnológico que se diferencia de la levadura tradicional de estudio Saccharomyces cerevisiae en diversos aspectos de su metabolismo. Mientras que en condiciones de aerobiosis y con glucosa como fuente de carbono K. lactis posee un metabolismo fundamentalmente respirativo, S. cervisiae lo tiene fermentativo en el mismo contexto. Estas diferencias metabólicas podrían ser el reflejo de una diferente regulación transcripcional de aquellos genes relacionados con la respiración en estos organismos tan próximos evolutivamente. En la presente Tesis se estudiaron una serie de genes que se consideran fundamentales en este aspecto. ScHEM1 y ScHEM12 codifican respectivamente la delta-aminolevulinato sintasa y la uroprofirinógeno descarboxilasa que catalizan el primer y quinto paso de la ruta de biosíntesis de hemo. Este grupo estructural de hemoproteínas como los citocromos, que participan en los procesos de respiración. ScHAP1 codifica un factor trascripcional activado por hemo que regula la expresión de genes relacionados con la respiración, y además activa la expresión de ScROX1 que reprime genes hipóxicos en condiciones aeróbicas. ScSRB10 codifica una quinasa que participa en procesos tanto de activación como de represión trascripcional. En estos últimos se caracteriza por interaccionar con el complejo represor Ssn6-Tup1p tras ser reclutado hacia las regiones promotoras de los genes por diversos factores represores, entre los que se encuentra la proteína Rox1p. En este trabajo se han clonado los genes K1HEM12, K1SRB10 y K1HAP1 demostrando para los dos primeros su funcionalidad mediante complementación de mutaciones en genes homólogos en S. cerevisiae. K1HAP1 no ha demostrado ser funcional en S.cerevisiae al menos bajo control de su propio promotor.