Estudio de la respuesta hipotálamo-hipofisaria de ratas prepúberes a ghrh y secretagogos de gh tras pretratamiento con somatostatina

Abstract

OBJETIVO En este trabajo se pretende estudiar, en ratas hembras prepúberes, la respuesta hipofisaria de las células somatotropas a hormona liberadora de GH (GHRH) y secretagogos de hormona de crecimiento aislados o en combinación, para conocer cuál es el estímulo liberador de GH más potente y que cambios suponen sobre la dinámica de la población somatotropa, comparando su acción con y sin pretratamiento con somatostatina (SRIH). Para el estudio de la reproducibilidad de sus efectos se analiza además la implicación hipotalámica de los principales núcleos encargados de la regulación de GH. MATERIAL Y MÉTODOS Se utilizaron ratas Wistar hembras prepúberes (26-28 días) divididas en doce grupos. Seis grupos recibieron como pretratamiento salino y seis recibieron SRIH al tiempo que denominamos -90 minutos. Al tiempo cero minutos, cada grupo recibió respectivamente SALINO, GHRH, GHRP-6, GHRELIN, GHRH+GHRP-6 y GHRH+GHRELIN. El tiempo de estudio concluyó a +90 minutos. Los animales fueron sacrificados por decapitación a distintos tiempos para conocer la respuesta a los estímulos: -90, -15, 0, +15, +30 y +90 minutos. Se obtuvieron muestras sanguíneas y los cerebros fueron extraídos para la obtención de hipotálamos e hipófisis. Los niveles séricos de GH fueron determinados mediante radioinmunoensayo. Las hipófisis, convenientemente fijadas e incluidas en parafina, fueron seccionadas y en los cortes se realizó inmunocitoquímica de GH. Se realizó posteriormente recuento de la población somatotropa obteniendo el porcentaje total de células osmatotropas y la proporción de células densa y débilmente inmunoteñidas. Los hipotálamos fueron congelados y posteriormente seccionados y las secciones fueron inmunoteñidas con anticuerpos para proteína c-fos, marcador indirecto de activación neuronal. Se realizó recuento de las neuronas marcadas con proteína c-fos en los diferentes núcleos hipotalámicos implicados: arcuato, peri