HMGB1 and HMGB2 Interactomes in Ovarian and Prostate Tumours

Resumen

La familia de proteínas HMGB está formada por proteínas nucleares con capacidad para unirse al ADN y participar en procesos de regulación transcripcional y reparación del ADN, así como para responder a daño oxidativo celular. El desarrollo de este trabajo tiene como objetivo identificar nuevas interacciones físicas de las proteínas HMGB1 y HMGB2 con otras proteínas en tumores de ovario y próstata. La identificación de nuevas interacciones físicas de estas proteínas permitiría comprender mejor su mecanismo de acción y su papel en las vías de señalización relacionadas con cáncer. Mediante aproximaciones experimentales basadas en el doble híbrido, se han realizado estudios proteómicos utilizando librerías de ADNc preparadas a partir de tumores de ovario y próstata aislados de pacientes. La funcionalidad de las interacciones encontradas también se ha validado mediante meta-análisis bioinformático de una recopilación de datos referentes a sus niveles de expresión y a su asociación con parámetros clínicos de supervivencia. Dos interacciones seleccionadas han sido además validadas por co- Inmunoprecipitación y por localización celular, mediante microscopía confocal a partir de células cancerosas en cultivo. Algunas características funcionales de las proteínas HMGB1 y HMGB2, así como de NOP53 y MIEN1 - detectadas en este estudio como nuevas proteínas de interacción física con las proteínas HMGB - se han analizado con mayor detalle. Se estudiaron los efectos producidos por su silenciamiento y la variación en los niveles de expresión ante tratamientos externos con compuestos utilizados en quimioterapia como carboplatino, paclitaxel, olaparib y bebacizumab. Además, las proteínas HMGB1, HMGB2, NOP53 y MIEN1, junto con los miRNAs miR-155, miR-124 y miR-146a, se detectaron en vesículas extracelulares (EV) derivadas de líneas celulares de próstata, viéndose alterado su contenido en estas moléculas tras el tratamiento con temozolomida (TMZ) o un nuevo compuesto híbrido basado en la TMZ y el ácido valpróico (1D). Este estudio es la base para la búsqueda de nuevos biomarcadores o dianas terapéuticas con utilidad para superar la resistencia a fármacos anti-tumorales utilizados actualmente en estos tipos de cáncer.