Anticuerpos monoclonales CD3caracterización de sus sitios de unión

Resumo

No se conoce el sitio de unión de los anticuerpos monoclonales anti-CD3 a pesar de su amplio uso clínico. Se ha demostrado que el anticuerpo anti-CD3 7D6 reconoce un determinante alotípico en CD3 de ratón y no se reconoce CD3-EPSILON por sí solo, si no que reconoce solo el módulo CD3-EPSILONGAMMA y no el CD3-EPSILON D. Por secuenciación y transfección en células Cos, hemos demostrado que el cambio de solo un aminoácido, la ASN89 LYS89 en la región extracelular de CD3-EPSILON de ratón es responsable del reconocimiento alotípico de 7D6 y la variación de este aminoácido define dos alelos para CD3-EPSILON de ratón. Un panel de seis anticuerpos monoclonales anti-CD3 de ratón también reconocen módulos y no subunidades aisladas en transfectantes de células Cos, aunque no discriminan entre CD3-EPSILON GAMMA y CD3-EPSILON D. El no reconocimiento de subunidades aisladas podría deberse a un control de plegamiento de CD3-EPSILON. En un modelo bi y tridimensional de CD3-EPSILON, el aminoácido ASN89 se ubica en un giro beta extracelular muy expuesto, que si es sustituido se pierde la unión de todos los anticuerpos anti-CD-3. Todos los anticuerpos anti-CD3 de ratón analizados compiten entre sí por la unión a CD3-EPSILON.