Progenitores linfohematopoyéticos del embrión de ratón post-gasrulación|bestudio de sus características celulares y establecimiento de líneas b de larga evolución in vitro, no transformadas y funcionales, capaces de reconstruir individuos adultos

Resumo

La finalidad de este trabajo es el estudio de los procesos y vías de diferenciación de los progenitores embrionarios y el análisis de sus diferencias con los que se producen en estadios ontogénicos más avanzados. Líneas celulares de diferentes áreas linfohematopoyéticas del embrión post-gastrulación (esplachnopleura paraaórtica, hígado, saco vitelino y sangre) y del adulto (hígado fetal tardío y médula ósea), se establecieron en cultivo en condiciones estroma/IL-7 dependientes. Los progenitores embrionarios son más sensibles a las señales de proliferación y supervivencia de la IL-7, ya que la frecuencia de obtención de líneas a partir de precursores embionarios a concentraciones limitadas de IL-7, es mayor que para progenitores procedentes del adulto. A pesar de crecer en condiciones idénticas, diversos aspectos de su programa de desarrollo "in vitro" se mantienen de forma distinta entre las líneas embrionarias y adultas, como la expresión de B220, IE, TdT y Pax5/BSAP. Las líneas embrionarias, que son policlonales, incluyen distintas poblaciones en diferentes estadios de desarrollo, desde los pregenitores pro-B más inmaduros, pasando por células pre-B hasta, incluso, el estadio de linfocito B inmaduro. Los linfocitos B, generados en estas líneas celulares responden eficientemente "in vitro" a estímulos convencionales tanto T-independientes como T-dependientes. Las líneas B embrionarias presentan un notable potencial de expanción y reconstrución de ratones inmunodeficientes adultos tras su transferencia y son capaces de generar respuestas inmunes humorales específicas "in vivo" tras una inmunización convencional. Estas líneas celulares obtenidas del embrión de ratón son fácilmente transfectables "in vitro". Por todo ello, proponemos que la generación y difusión de líneas linfoides B de origen ontogénico temprano (ratón postgastrulación) puede representar una importante herramienta para abordar la b